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血清你了解多少?

發(fā)布時(shí)間: 2017-01-12  點(diǎn)擊次數(shù): 1900次

   血清對(duì)于在傳統(tǒng)培養(yǎng)基配方中生長(zhǎng)和增殖的大多數(shù)細(xì)胞系來(lái)說(shuō)是需要的,因?yàn)榇蠖鄶?shù)單獨(dú)的培養(yǎng)基并不能提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需要的全部營(yíng)養(yǎng),如MEM培養(yǎng)基,較為常用的量為8%~10%的比例,原代培養(yǎng)使用量為15%~20%,而特殊的低血清培養(yǎng)基血清量可降至3%左右,細(xì)胞的形態(tài)和功能不受影響。

血清是非常復(fù)雜的混合物,成分多樣,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)具有促進(jìn)作用:

1)提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì);

2)提供激素和各種生長(zhǎng)因子,如胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素(、地塞米松)、類固醇激素(雌二醇、睪酮、孕酮)、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、血小板生長(zhǎng)因子等;

3)提供結(jié)合蛋白,可攜帶重要的低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵,在細(xì)胞代謝過(guò)程中起重要作用;有些情況下結(jié)合蛋白能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用;

4)血清能提供促接觸和伸展因子,使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷,對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用;

5)能夠維持培養(yǎng)基的pH 值,起酸堿緩沖液作用;

6)有一些細(xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,現(xiàn)在則有目的的使用血清來(lái)終止胰蛋白酶的消化作用。因?yàn)橐鹊鞍酌敢呀?jīng)被廣泛用于貼壁細(xì)胞的消化傳代;

7)血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時(shí),粘度起到重要作用;

8)血清還含有一些微量元素和離子,它們?cè)诖x穩(wěn)定和解毒中起重要作用。

但是血清的加入也帶來(lái)了很多問(wèn)題:

1)血清的成分可能有幾百種之多,目前對(duì)其準(zhǔn)確的成分、含量及其作用機(jī)制仍不清楚,尤其是對(duì)其中一些多肽類生長(zhǎng)因子、激素和脂類等尚未充分認(rèn)識(shí),這給研究工作帶來(lái)許多困難;

2)血清都是批量生物試劑,各批量之間差異很大,這種差異來(lái)源于不同的制備方法和除菌方法、動(dòng)物的年齡差別及血清的儲(chǔ)存條件等,而且與取血?jiǎng)游锏膩?lái)源關(guān)系密切。不同的牧場(chǎng)、不同的氣候天氣及其他環(huán)境因素都可能影響血清的質(zhì)量。要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制。因此選好了一種血清就要盡可能使用它。在需要更換時(shí),也要盡量保持與原有的一批血清相似?,F(xiàn)在很多公司都提供血清預(yù)留,你一旦選定了某個(gè)批次的血清,備足一年的量,這樣可以避免很多麻煩;

3)對(duì)大多數(shù)細(xì)胞,在體內(nèi)狀態(tài),只是在損傷愈合以及血液凝固過(guò)程中才接觸血清,因此使用血清有可能改變某種細(xì)胞在體內(nèi)的正常狀態(tài),血清可能促進(jìn)某些細(xì)胞的生長(zhǎng)(成纖維細(xì)胞)同時(shí)抑制另一類細(xì)胞生長(zhǎng)(表皮細(xì)胞);

4)血清含一些對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性的物質(zhì),如多胺氧化酶,能與來(lái)自高度繁殖細(xì)胞的多胺反應(yīng)(如精胺、亞精胺)形成有細(xì)胞毒性作用的聚精胺,補(bǔ)體、抗體、細(xì)菌毒素等都會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),甚至造成細(xì)胞死亡;

5)血清取材中可能帶入支原體、病毒,如具有爭(zhēng)議的黑膠蟲,對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生潛在影響;

6)大規(guī)模生物試劑中,血清來(lái)源越來(lái)越困難,價(jià)格昂貴,是構(gòu)成生物試劑成本的主要部分之一。

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