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大鼠乙酰膽堿酯酶(AchE)elisa試劑盒的檢測技術(shù)

發(fā)布時間: 2017-05-09  點擊次數(shù): 1411次

大鼠乙酰膽堿酯酶(AchE)elisa試劑盒基本信息簡介

乙酰膽堿酯酶簡稱AchE,具有羧肽酶和氨肽酶的活性。乙酰膽堿酯酶參與細胞的發(fā)育和成熟,能促進神經(jīng)元發(fā)育和神經(jīng)再生。Chubbe等的研究證明,AchE具有羧肽酶和氨肽酶的活性。在體外,AchE能水解腦啡肽(Enk)和P物質(zhì)(SP),但不能水解生長抑素(Som)和血管加壓素(VSP)等。進一步的研究證明,AchE作為肽酶,其水解肽的活性部位和作為酯酶的活性部位不同。值得注意的是,神經(jīng)系統(tǒng)許多非膽堿能的,含大量AchE的神經(jīng)元同時亦含有各種神經(jīng)肽類物質(zhì)。如脊髓背根節(jié)的SP能細胞即是AchE強陽性。zui近的研究顯示,高度純化的來自電鰻電器官或牛血清的AchE具有蛋白酶樣或外切酶的活生。對于血清蛋白質(zhì),AchE能發(fā)揮C端殘基的清除作用。此外,AchE的蛋白酶樣作用還得到分子生物學(xué)證據(jù)的支持,氨基酸分析顯示,AchE蛋白質(zhì)分子與蛋白酶樣內(nèi)切酶以及血清羧肽酶的氨基酸序列相似。在它們的C端36個殘基范圍內(nèi),有40%氨基酸序列和蛋白酶的活性片段相同。

大鼠乙酰膽堿酯酶(AchE)elisa試劑盒檢測技術(shù)簡介

間接法

  1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜;

  2.次日洗滌3次;

  3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌;

  4.(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml;

  5.37℃孵育30-60分鐘,洗滌;

6.’zui后一遍用DDW洗滌。

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