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抗酸染色液操作方法!

發(fā)布時(shí)間: 2018-04-18  點(diǎn)擊次數(shù): 2253次

抗酸染色液操作方法!

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

抗酸染色用于細(xì)菌標(biāo)本涂片或菌落涂片的染色。常用于對(duì)分枝桿菌屬進(jìn)行初步鑒別。普通細(xì)菌染色比較容易著色,而分支桿菌細(xì)胞壁含脂質(zhì)較多,染色比較困難,必須加熱才能被Carbolfuchsin solution著色。分枝桿菌菌體著色后,能抵抗鹽酸酒精等酸性脫色劑的脫色,而其他細(xì)菌和細(xì)胞等均被脫色。當(dāng)再用堿性美藍(lán)復(fù)染后,分支桿菌仍為紅色,其他細(xì)菌與背景呈藍(lán)色。

試劑盒組成:
抗酸染色液A 50ml/100ml/250ml
抗酸染色液B 50ml/100ml/250ml
抗酸染色液C 50ml/100ml/250ml

規(guī)格:3×50ml/3×100ml/3×250ml
保存:室溫干燥保存,有效期3年。

抗酸染色的原理:

分枝桿菌的細(xì)胞壁內(nèi)含有大量的脂質(zhì),包圍在肽聚糖的外面,所以分枝桿菌一般不易著色,要經(jīng)過(guò)加熱和延長(zhǎng)染色時(shí)間來(lái)促使其著色。但分枝桿菌中的分枝菌酸與染料結(jié)合后,就很難被酸性脫色劑脫色,故名抗酸染色。
齊-尼氏抗酸染色法是在加熱條件下使分枝菌酸與石炭酸復(fù)紅牢固結(jié)合成復(fù)合物,用鹽酸酒精處理也不脫色。當(dāng)再加堿性美蘭復(fù)染后,分枝桿菌仍然為紅色,而其他細(xì)菌及背景中的物質(zhì)為藍(lán)色。

操作步驟:

1、 做一適當(dāng)厚度的涂片,干燥后火焰固定。

2、 滴加抗酸染色液A于玻片上,覆蓋住樣本,在酒精燈上加熱,切勿沸騰,出現(xiàn)蒸汽即暫時(shí)移開(kāi),必要時(shí)可續(xù)加染色劑以免干涸。加熱3-5分鐘。

3、 移開(kāi)火,靜置5分鐘,待標(biāo)本冷卻后以自來(lái)水沖洗。

4、 用抗酸染色液B脫色(大約1分鐘)至無(wú)紅色染液脫出為止。*脫色可避免產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果。

5、 自來(lái)水緩慢沖洗后,滴加抗酸染色液C復(fù)染約30秒,水洗。

6、 待干后油鏡觀察。

預(yù)期結(jié)果:

抗酸菌被染成紅色,為抗酸陽(yáng)性;其它細(xì)菌染成藍(lán)色,為抗酸陰性。背景細(xì)胞及雜質(zhì)也被染成藍(lán)色。

注意事項(xiàng):

1. 染色程度可通過(guò)改變?nèi)旧珪r(shí)間或染色溫度做適當(dāng)調(diào)整。

2. 每次試劑用完后,請(qǐng)迅速蓋好,以免揮發(fā)。

3. 本產(chǎn)品有一定的刺激性和腐蝕性,使用時(shí)請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

抗酸染色液操作方法!

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