国产精品自产拍在线观看_色偷偷偷久久伊人大杳蕉_亚洲av无码xxx麻豆艾秋_国产欧美在线观看不卡_精国产品一区二区三区a片

熱門搜索:ELISA試劑盒,生物試劑,質(zhì)控品,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),化學(xué)試劑,生化試劑盒
產(chǎn)品分類

Product category

技術(shù)文章 / article 您的位置:網(wǎng)站首頁 > 技術(shù)文章 > 潮霉素B液體和干粉原來是這樣操作!

潮霉素B液體和干粉原來是這樣操作!

發(fā)布時(shí)間: 2018-12-05  點(diǎn)擊次數(shù): 2680次

潮霉素B液體和干粉原來是這樣操作!

 

潮霉素B(Hygromycin B)是由吸水鏈霉菌(Streptomyces hygroscopicus)代謝產(chǎn)生的一種氨基糖苷類抗生素,通過干擾70S核糖體易位和誘導(dǎo)對mRNA模板的錯(cuò)讀而抑制蛋白合成,從而殺死原核(如細(xì)菌)、真核(如酵母菌,真菌)和高等哺乳動(dòng)物真核細(xì)胞。

 

液體:無菌的潮霉素B溶液(100mg/ml),可直接用培養(yǎng)液稀釋使用。

干粉:本品是潮霉素B干粉,用于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)溶解后過濾除菌。溶劑水,PBS溶液。

 

常用篩選濃度

注意:潮霉素B用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,使用濃度為50-1000μg/mL。對于次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定*篩選濃度。

一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

 

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1)     轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷效果。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%。

2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

 

注意事項(xiàng)

1) 潮霉素B的抗性基因(hyg或hph)除了來自E. Coli.之外,還發(fā)現(xiàn)于其他的菌株,包括Streptomyces hygroscopicus和Klebsiella pneumoniae。

2) 本品為有毒化合物,避免與皮膚和眼睛接觸,請小心操作。

3) 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

  • 聯(lián)系電話電話025-66060117
  • 傳真傳真
  • 郵箱郵箱3452523816@qq.com
  • 地址公司地址南京市雨花臺(tái)區(qū)賽虹橋街道小行路
© 2025 版權(quán)所有:南京信帆生物技術(shù)有限公司   備案號(hào):蘇ICP備16008122號(hào)-4   sitemap.xml   管理登陸   技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)       
  • 公眾號(hào)二維碼

聯(lián)


日韩中文字幕免费视频| 日韩欧美猛交xxxxx无码| 日韩精品无码免费专区网站| 国产免费人成视频在线播放播| 亚洲日韩一区精品射精| 一级尤物视频在线观看| 国产日产欧产精品精品蜜芽| 制服丝袜人妻中文字幕在线| 国产人妻精品区一区二区三区| 欧美白人最猛性xxxxx| 青青国产线免观| 国产成人精品优优av| 任你躁国产自任一区二区三区| 免费视频成人片在线观看| 少妇上班人妻精品偷人| 久久精品欧美日韩精品| 日韩精品无码一区二区| 久久国产精品无码网站| 极品嫩模高潮叫床| 在线视频网站www色| 久久精品中文字幕大胸| 亚洲日韩精品无码av海量| 亚洲成人色区| 色综合 图片区 小说区| 无码成人aaaaa毛片| 另类 专区 欧美 制服| 99精品国产高清一区二区麻豆| 日本艳妓bbw高潮一19| 不卡av中文字幕手机看| 国产精品爆乳奶水无码视频| 天天摸日日摸狠狠添| 亚欧免费无码aⅴ在线观看| 国产香港明星裸体xxxx视频| 国产精品久久久久永久免费看| 兔费看少妇性l交大片免费| 中文成人无字幕乱码精品区| 成年女人喷潮免费视频| 国产97人人超碰caoprom| 丁香五月缴情在线| 精品熟女少妇av免费久久| 中文幕无线码中文字夫妻|