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WB實(shí)驗(yàn)代測(cè),Western Blot技術(shù)服務(wù)

發(fā)布時(shí)間: 2019-03-18  點(diǎn)擊次數(shù): 1990次

WB實(shí)驗(yàn)代測(cè),Western Blot技術(shù)服務(wù)


產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

免疫印跡(immunoblotting)又稱(chēng)蛋白質(zhì)印跡(Westernblotting),它是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測(cè)復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測(cè)定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新的免疫生化技術(shù)。由于免疫印跡具有SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測(cè)定的高特異性和敏感性,現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術(shù)。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白,并能對(duì)蛋白進(jìn)行定性和半定量分析。


凝膠遷移或電泳遷移率實(shí)驗(yàn)(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一種研究DNA結(jié)合蛋白和其相關(guān)的DNA 結(jié)合序列相互作用的技術(shù),可用于定性和定量分析。這一技術(shù)zui初用于研究DNA 結(jié)合蛋白,目前已用于研究RNA結(jié)合蛋白和特定的RNA 序列的相互作用。



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WB實(shí)驗(yàn)代測(cè),Western Blot技術(shù)服務(wù)

成功完成Western Blot檢測(cè),必須滿(mǎn)足4個(gè)條件:

 


凝膠洗脫:轉(zhuǎn)移期間蛋白質(zhì)必須從凝膠中洗脫出來(lái),如果蛋白質(zhì)還截留在凝膠中,將無(wú)法在膜上進(jìn)行分析

 


吸附到膜上:在轉(zhuǎn)移過(guò)程中蛋白質(zhì)必須吸附到膜上,如果蛋白不吸附,將無(wú)法在膜上進(jìn)行分析處理期間仍截留在膜上:在轉(zhuǎn)移后的處理過(guò)程中蛋白質(zhì)必須保持吸附在印跡膜上

 


處理過(guò)程中可接近:被吸附的蛋白質(zhì)必須能夠與檢測(cè)試劑接觸,如果蛋白質(zhì)被掩蓋則無(wú)法檢測(cè)成功進(jìn)行WB檢測(cè),則設(shè)置合適正確的對(duì)照是*的,只要正確設(shè)置了這些對(duì)照,即可快速和準(zhǔn)確的找到WB的問(wèn)題所在,并保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和特異性!


一般需要設(shè)置的對(duì)照如下:

 

陽(yáng)性對(duì)照:明確表達(dá)檢測(cè)蛋白的組織或細(xì)胞,用于檢測(cè)抗體的工作效率

 

陰性對(duì)照:明確不表達(dá)檢測(cè)蛋白組織或細(xì)胞,用于檢測(cè)抗體的特異性

 

二抗對(duì)照:不加一抗,用于檢測(cè)二抗的特異性

 

內(nèi)參對(duì)照:檢測(cè)標(biāo)本的質(zhì)量和二抗系統(tǒng)

 

空白對(duì)照:不加一抗和二抗;用于檢測(cè)膜的性質(zhì)和封閉的效果 


WB實(shí)驗(yàn)代測(cè),Western Blot技術(shù)服務(wù)

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