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BCA蛋白定量試劑盒操作方便,快捷!

發(fā)布時間: 2019-09-16  點擊次數(shù): 2629次

BCA蛋白定量試劑盒操作方便,快捷!


目前世界上常用的蛋白濃度檢測方法是:BCA蛋白定量試劑盒(BCA Protein AssayKit)和Bradford蛋白定量試劑盒(Bradford Protein Assay Kit)。BCA 法與傳統(tǒng)方法相比,更簡單、更穩(wěn)定、更靈敏度。BCA法測定蛋白濃度兼容性亦很好,不受大部分樣本中其他成分的影響,對于5%以內(nèi)的SDS、Triton X-100、Tween 20、 Tween 80具有很好的兼容性。BCA法測定蛋白濃度易受螯合劑、高濃度的還原劑影響。在BCA法測定蛋白濃度前應(yīng)盡量使EDTA濃度≤m10M; DTT濃度≤1mM,2-ME≤0.01%。




規(guī)格:250T

保存:室溫,避光,

有效期:12個月

用途:總蛋白定量的二喹啉甲酸/BCA分析

說明:主要由BCA溶液、Cu溶液、BSA標(biāo)準品組成,在562nm處測吸光值,檢測范圍在200-1000ug/ml。

 

操作注意:

1、 蛋白標(biāo)準(BSA)粉末溶解于蛋白標(biāo)準配制液后,即獲得蛋白標(biāo)準原液,該原液中含有防腐劑,不影響后續(xù)檢測,該蛋白標(biāo)準原液-20℃保存。

 

2、 待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中,蛋白標(biāo)準也宜溶解于什么樣的稀釋液中,否者待測蛋白與蛋白標(biāo)準中所含非蛋白成分不一致,有可能導(dǎo)致測定不準確。


3、 待測蛋白和蛋白標(biāo)準加入BCA工作液后,如果發(fā)現(xiàn)檢測效果不佳,可以室溫放置2h或60℃放置30min,顏色會隨著時間的延長不斷加深。顯色反應(yīng)也會隨溫度升高而加快。如果濃度較低,可以適當(dāng)延長孵育時間或在較高溫度下孵育。
 

4、 測定標(biāo)準曲線時發(fā)現(xiàn)隨著標(biāo)準品濃度的增加吸光度或顏色沒有明顯變化,可能的原因是樣品中含有嚴重干擾BCA法測定蛋白濃度的物質(zhì)。


二價銅離子在堿性的條件下,可以被蛋白質(zhì)還原成一價銅離子,一價銅離子和*的BCA Solution A(含有BCA)相互作用產(chǎn)生敏感的顏色反應(yīng)。兩分子的BCA螯合一個銅離子,形成紫色的反應(yīng)復(fù)合物。該水溶性的復(fù)合物在562nm處顯示強烈的吸光性,吸光度和蛋白濃度在廣泛范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系,因此根據(jù)吸光值可以推算出蛋白濃度。


BCA蛋白定量試劑盒操作方便,快捷!
 

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