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小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1檢測原理!

發(fā)布時(shí)間: 2021-10-08  點(diǎn)擊次數(shù): 788次

小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1檢測原理!

產(chǎn)品名稱:小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA檢測試劑盒

規(guī)格:48T/96T

儲存:2-8℃,避光防潮保存。

有效期:6個月

本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)用,不做其它用途!

檢測原理:本試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1TGF-β1)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1TGF-β1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。

實(shí)驗(yàn)步驟(僅供參考):

1.  從室溫平衡60min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

3.  待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;

4.  隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。





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