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植物類黃酮檢測試劑盒的技術(shù)參數(shù)

發(fā)布時間: 2023-12-01  點擊次數(shù): 408次

 植物類黃酮檢測試劑盒的技術(shù)參數(shù)

一、測定意義:

類黃酮是一類多苯化合物,屬于植物次生代謝物,對人

體具有消炎,抗菌,降血脂,清除體內(nèi)羥自由基,預防癌癥

等作用

二、測定原理:

在堿性亞硝酸鹽溶液中,類黃酮與鋁離子形成在502nm

有特征吸收峰的紅色絡(luò)合物,測定樣品提取液在502nm處的吸

光值,即可計算樣品類黃酮含量。

三、儀器設(shè)備(自備):

烘箱、粉碎儀、研缽、篩子、60%乙醇、離心機、可見分

光光度計、60℃震蕩恒溫箱。

四、試劑組成:(50T/48 樣)

提取液:60%乙醇,自備。

試劑一:液體2mL×1 瓶,4℃保存。

試劑二:液體2mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體25mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:標準品粉劑 1mg×1支,使用時加入1mL 60%乙醇,

60℃恒溫振蕩10分鐘使其溶解,配成mg/mL

標準應用液。

五、操作步驟:

1、類黃酮提?。?/span>

干樣:將樣本烘干至恒重,粉碎,過40目篩之后,稱取約0.02g

加入2mL 提取液,60℃震蕩提取2小時,10000g,室溫

離心10min,取上清,待測。

鮮樣:將植物用生理鹽水清洗后,將表面水分擦干,剪碎,

液氮研磨成粉狀,稱取約0.05g,加入2mL提取液(含

量低可酌情減少提取液量),60℃震蕩提取2小時,

10000g,室溫離心10min,取上清,待測。

2、操作表:

 

注:正式實驗前最好取1-2例相對差異較大的樣本進行預試,

ΔA測定大于1時需要稀釋樣本上清后再測定。

六、計算公式:

制作標準曲線:將1mg/mL標準液用60%乙醇稀釋成

0.1mg/mL、0.08mg/mL、0.06mg/mL0.04mg/mL、

0.02mg/mL幾個濃度按操作表標準管及空白管進行實驗,

得出OD值后繪制標準曲線,如下:

 

則計算公式為:

類黃酮含量(mg/g=ΔA測定-0.0141÷9.0771×提取液總體

積(2mL÷樣本質(zhì)量(g

七、技術(shù)參數(shù):

1、試劑盒檢出限為1μg/mL,如果ΔA測定值大于1,則需將樣本

上清液作適當稀釋以后測定;

2、本試劑盒回收率可達95%-100%,穩(wěn)定性好,準確性高;

3、標準品配置時溫度低會使其溶解緩慢,60℃振蕩溶解時需

密封好,防止液體溢出造成損失;

4、假如沒有分光光度計,也可用酶標儀進行測定,波長不變

(或者在±10nm波動范圍內(nèi)選擇)。

 植物類黃酮檢測試劑盒的技術(shù)參數(shù)


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