信帆生物提供PCR技術(shù)服務(wù)，Q-PCR技術(shù)服務(wù)，RT-PCR實(shí)驗(yàn)代做！

南京信帆生物提供 PCR實(shí)驗(yàn)代測(cè)，實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)代測(cè)，RT-PCR代測(cè)。客戶只需要提供樣本，其他所有試劑都由本公司提供。一般7-10天出結(jié)果，提供原始數(shù)據(jù)，分析數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)報(bào)告，實(shí)驗(yàn)室所用儀器型號(hào)，圖片，動(dòng)力擴(kuò)增曲線等。我們有的設(shè)備加上技術(shù)嫻熟的實(shí)驗(yàn)操作人員，一定讓您的每一份實(shí)驗(yàn)結(jié)果均真實(shí)可靠，咨詢！

簡(jiǎn)介：

Real -Time PCR，即實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物并進(jìn)行解析的方法，它是在PCR反應(yīng)體系中加入熒光物質(zhì)，并通過(guò)Real -Time PCR檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)PCR反應(yīng)進(jìn)程中的熒光信號(hào)強(qiáng)度進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，zui終對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理的方法。Real -Time PCR自1996年由美國(guó)Applied Biosystems公司推出以來(lái)，廣泛應(yīng)用于生物研究的各個(gè)領(lǐng)域。目前主要有SYBR Green 染料、Taqman探針?lè)▋煞N。

PCR實(shí)驗(yàn)代測(cè)，熒光定量PCR代測(cè)服實(shí)驗(yàn)室試劑的操作

1)所用的所有溶液都應(yīng)該沒(méi)有核酸和(或)核酸酶(DNase和RNase)污染。

2)所有PCR試劑中使用的水都應(yīng)該是高質(zhì)量的-新鮮蒸餾的去離子水，用0.22μm過(guò)濾的，并且是高壓滅菌。

3)在20℃到25℃貯存的試劑建議加點(diǎn)像疊氮鈉一類的抗微生物劑，在擴(kuò)增試劑或樣品制備試劑中加入0.025%的疊氮鈉不抑制擴(kuò)增反應(yīng)。

4)所用試劑都應(yīng)該以大體積配制，實(shí)驗(yàn)一下看試劑是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量進(jìn)行貯存。

5)所有試劑和樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的瓶子和管子。

6)新配制的試劑在用于準(zhǔn)備新的標(biāo)本之前應(yīng)該加以檢驗(yàn)。

7)樣品準(zhǔn)備和前PCR區(qū)所使用的移液管在不使用時(shí)都應(yīng)該小心保存

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操作程序 ：

1．在無(wú)菌的Eppendorf管內(nèi)加入以下反應(yīng)物：

2．93℃ 反應(yīng)2 min后開(kāi)始以下循環(huán)： 
93℃變性反應(yīng)1 min； 
50℃退火反應(yīng)1 min； 
72℃延伸反應(yīng)3 min。 
經(jīng)過(guò)17～35循環(huán)后，zui后一個(gè)循環(huán)72℃增加5 min。循環(huán)結(jié)束后反應(yīng)產(chǎn)物置于40℃保存。 

3．取1～5ml反應(yīng)產(chǎn)物走凝膠電泳，經(jīng)溴化乙錠染色檢測(cè)擴(kuò)增的情況。
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PCR實(shí)驗(yàn)代測(cè)，熒光定量PCR代測(cè)服主要儀器及耗材

旋渦振蕩器 ：上海青浦瀘西儀器廠產(chǎn)品
手握式電動(dòng)勻漿機(jī)：德國(guó)FLUKO 公司產(chǎn)品
低溫冷凍離心機(jī)：Sigma（3K15）公司產(chǎn)品
Real-time檢測(cè)儀：ABI （ABI-7300）公司產(chǎn)品
超純水分離系統(tǒng)：美國(guó)LABCONCO公司
離心管及10μL、200μL、1000μL槍頭等常規(guī)耗材均為國(guó)產(chǎn)；RNA提取過(guò)程中所需的離心管、槍頭等耗材經(jīng)過(guò)0.1%的DEPC水浸泡過(guò)夜，121℃滅菌30min，烘干后備用。

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