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信帆生物知識(shí)普及:人白細(xì)胞介素22試劑盒中顯色液的作用有哪些!

發(fā)布時(shí)間: 2019-07-04  點(diǎn)擊次數(shù): 697次

信帆生物知識(shí)普及:人白細(xì)胞介素22elisa試劑盒中顯色液的作用有哪些!

 

中文名稱白細(xì)胞介素-22

英文名稱interleukin-22;IL-22

定 義屬IL-10家族細(xì)胞因子,由多種細(xì)胞產(chǎn)生,組成性表達(dá)于胸腺和腦組織,可誘導(dǎo)急性期蛋白產(chǎn)生。

應(yīng)用學(xué)科 免疫學(xué)(一級(jí)學(xué)科),免疫系統(tǒng)(二級(jí)學(xué)科),免疫分子(三級(jí)學(xué)科)

 

酶聯(lián)免疫診斷試劑盒的底物A就是顯色劑A(含過氧化氫)為供氫體(DH2),底物B就是顯色劑B(含TMB),用于顯色。另外,常用的底物還有:

AP的底物,常用的為對(duì)-硝基苯磷酸脂(PNP),其反應(yīng)物為黃色的對(duì)硝基酚,測(cè)讀波長(zhǎng)為405nm2)GOD的底物,為葡萄糖,供氫體為對(duì)硝基藍(lán)四氮唑,反應(yīng)產(chǎn)物為不溶性的藍(lán)色沉淀什么是TMB?TMB即四甲基聯(lián)苯胺(3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine)是一種脂溶性較強(qiáng)的基團(tuán),因此容易進(jìn)入細(xì)胞與細(xì)胞器中的HRP反應(yīng),且由于這種高度的脂溶性,使其易形成多聚體,在HRP活性部位產(chǎn)生粗大的、深蘭色沉淀物,這使得TMB成為組化實(shí)驗(yàn)中的一種很好的發(fā)色團(tuán)。同時(shí)反應(yīng)產(chǎn)物的沉淀,使得HRP的活性部位更加暴露,利于酶氧化反應(yīng)進(jìn)行。

 

TMB的反應(yīng)產(chǎn)物為深藍(lán)色,利于光鏡觀察,且反應(yīng)產(chǎn)物越聚越大,常超出單個(gè)細(xì)胞器的范圍(而DAB則被限制在其內(nèi)),故TMB反應(yīng)的檢測(cè)閾較低。

 

由于上述優(yōu)點(diǎn),目前TMB常用于光鏡及超微結(jié)構(gòu)水平的HRP及HRP-WGA神經(jīng)投射的研究。需要注意的是:TMB顯色液中的A液和B液應(yīng)在2h內(nèi)新鮮配制。另外,TMB是一種較強(qiáng)的皮膚刺激劑,并有致癌的潛在可能,故使用時(shí)應(yīng)帶手套及在通風(fēng)條件下操作...酶聯(lián)免疫診斷試劑盒(上??迫A的試劑盒)的底物A就是顯色劑A(含過氧化氫)為供氫體(DH2),底物B就是顯色劑B(含TMB),用于顯色。

另外,常用的底物還有:1)AP的底物,常用的為對(duì)-硝基苯磷酸脂(PNP),其反應(yīng)物為黃色的對(duì)硝基酚,測(cè)讀波長(zhǎng)為405nm2)GOD的底物,為葡萄糖,供氫體為對(duì)硝基藍(lán)四氮唑,反應(yīng)產(chǎn)物為不溶性的藍(lán)色沉淀,什么是TMB?TMB即四甲基聯(lián)苯胺(3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine)是一種脂溶性較強(qiáng)的基團(tuán),因此容易進(jìn)入細(xì)胞與細(xì)胞器中的HRP反應(yīng),且由于這種高度的脂溶性,使其易形成多聚體,在HRP活性部位產(chǎn)生粗大的、深蘭色沉淀物,這使得TMB成為組化實(shí)驗(yàn)中的一種很好的發(fā)色團(tuán)。同時(shí)反應(yīng)產(chǎn)物的沉淀,使得HRP的活性部位更加暴露,利于酶氧化反應(yīng)進(jìn)行。TMB的反應(yīng)產(chǎn)物為深藍(lán)色,利于光鏡觀察,且反應(yīng)產(chǎn)物越聚越大,常超出單個(gè)細(xì)胞器的范圍(而DAB則被限制在其內(nèi)),故TMB反應(yīng)的檢測(cè)閾較低。由于上述優(yōu)點(diǎn),目前TMB常用于光鏡及超微結(jié)構(gòu)水平的HRP及HRP-WGA神經(jīng)投射的研究。

 

需要注意的是:TMB顯色液中的A液和B液應(yīng)在2h內(nèi)新鮮配制。另外,TMB是一種較強(qiáng)的皮膚刺激劑,并有致癌的潛在可能,故使用時(shí)應(yīng)帶手套及在通風(fēng)條件下操作。TMB經(jīng)HRP作用后共產(chǎn)物顯藍(lán)色,目視對(duì)比鮮明。TMB性質(zhì)較穩(wěn)定,可配成溶液試劑,只需與H2O2溶液混和即成應(yīng)用液,可直接作底物使用。

 

另外,TMB又有無致癌性等優(yōu)點(diǎn),因此在ELISA中應(yīng)用日趨廣泛。酶反應(yīng)用HCL或H2SO4終止后,TMB產(chǎn)物由藍(lán)色呈黃色,可在比色計(jì)中定量,適吸收波長(zhǎng)為405nm。ABTS雖不如OPD和TMB敏感,但空白值極低,也為一些試劑盒所采用。

 

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