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明膠酶譜試劑盒這樣染色才正確!

發(fā)布時(shí)間: 2019-10-08  點(diǎn)擊次數(shù): 654次

明膠酶譜試劑盒這樣染色才正確!




明膠酶譜分析試劑盒(matrix metalloproteinase, MMP)以無(wú)活性的酶原形式分泌,活化后能夠降解細(xì)胞外基質(zhì)的膠原蛋白,又稱膠原酶。通過(guò)影響細(xì)胞外基質(zhì),膠原酶參與胚胎發(fā)育、形態(tài)發(fā)生、組織重塑等過(guò)程,并參與炎癥、腫瘤、心血管、神經(jīng)等許多疾病過(guò)程。明膠酶譜法試劑盒!


常規(guī)考馬斯亮藍(lán)SDS-PAGE 凝膠蛋白質(zhì)染色是實(shí)驗(yàn)室常用的凝膠染色方法。銀染方法雖然靈敏度高,但所需試劑復(fù)雜并且有毒有害,操作步驟繁瑣,難以控制獲得好的染色效果。

 

 

染色步驟:

 

1. 此染色液即為工作液,使用時(shí)直接將聚丙烯酰胺凝膠放在培養(yǎng)皿中以考馬斯亮藍(lán)染色液覆蓋凝膠,并緩慢搖動(dòng)2h;

 

2. 傾去染色液,用脫色液沖洗凝膠;

 

3. 以脫色液覆蓋凝膠,緩慢搖動(dòng)2h,傾去脫色液,再加入新脫色液進(jìn)行脫色,直至獲得清晰的藍(lán)色的條帶和干凈的背景(通常此過(guò)程需要2~4h,也可脫色過(guò)夜至清晰的藍(lán)色的條帶和干凈的背景);

 

4. 對(duì)凝膠進(jìn)行分析和照相,凝膠可放置在7%的乙酸中保存。也可用凝膠干膠裝置(P2000)對(duì)凝膠進(jìn)行處理后保存。

 

安全性:含有甲醇,無(wú)特殊毒性,按一般化學(xué)品操作規(guī)程處理。

 

.參考文獻(xiàn):

 

1. Nagase H and Woessner JF. Matrix Metalloproteinases. J Biol Chem, 1999, 274, 21491-21494

 

2. Heussen C, and Dowdle EB. Electrophoretic analysis of plasminogen activators in polyacrylamide

 

gels containing sodium dodecyl sulfate and copolymerized substrates. Anal. Biochem,1980, 102,196–202

3.綠茶多酚EGCG增強(qiáng)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性及其相關(guān)機(jī)制研究



明膠酶譜試劑盒這樣染色才正確!

 

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