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信帆生物提供促黃體生成激素放免代測服務(wù)一步到位
促黃體生成激素(LH)放免藥盒 [使用目的]
用于定量測定人血清(或血漿)中促黃體生成激素(LH)的濃度。
[用途]
促黃體生成激素(LH)是垂體前葉分泌,有兩條多肽鏈通過共價(jià)鍵結(jié)合的糖蛋白激素,分子量為 30000,參與性腺內(nèi)分泌功能調(diào)控。對女性,在月經(jīng)中期 LH 達(dá)到高峰時(shí)促成排卵,促進(jìn)卵泡變?yōu)辄S體,促進(jìn)間質(zhì)生長和孕酮合成;對男性,促進(jìn)睪丸 Leydig 間質(zhì)細(xì)胞分泌睪丸酮,協(xié)同 FSH 促進(jìn)精子形成。促黃體生成激素(LH)的測定是判斷下丘腦-垂體-性腺軸功能的常規(guī)檢查方法,在預(yù)測排卵時(shí)間、絕經(jīng)期和不孕癥的診斷和內(nèi)分泌治療方面,具有重要意義。
本品采用了第二抗體+聚已二醇沉淀法放射免疫分析試驗(yàn)原理:含促黃體生成激素(LH)的樣品和 125I 標(biāo)記的促黃體生成激素(LH)與相應(yīng)的抗體反應(yīng)形成抗原抗體復(fù)合物。反應(yīng)后加入二抗及 PEG,使免疫復(fù)合物沉淀,離心,測沉淀放射性計(jì)數(shù)。通過標(biāo)準(zhǔn)曲線得到樣本中促黃體生成激素(LH)的濃度。
[試劑主要組成成分]
1、 LH 標(biāo)準(zhǔn)品:一套共 7 瓶,以不含 LH 的人血清為基質(zhì),用時(shí)輕輕搖勻,需冷存。LH 標(biāo)準(zhǔn)品濃度
A B C D E F G (單位) 0 5 10 25 50 100 200 mIU/mL
本 藥 盒 標(biāo) 準(zhǔn) 品 濃 度 采 用 WHO 2ndIRPHMG, 與 WHO 68/40 的 換 算 關(guān) 系 為 :
mIU/ml[2ndIRPHMG]×0.65=mIU/ml[68/40]
2、 質(zhì)控血清:兩瓶,1.0ml/瓶
濃度為:L:11.05±2.79 mIU/ml H:22.53±7.31 mIU/ml
3、抗 LH 抗體: 一瓶,綠色溶液,2~8℃冷存。
4、 125I-LH: 一瓶,< 88.23 kBq/瓶,紅色溶液,2~8℃冷存。
5、 分離劑: 兩瓶,藍(lán)色溶液,充分搖勻后使用,2~8℃冷存。
[儀器] 1、 γ-計(jì)數(shù)器 2、低溫離心機(jī)
樣本收集和保存:
220 微升人血清樣本。采靜脈血 5ml 于塑料試管中,靜置使其凝固后,1500 轉(zhuǎn)/分離心,取其上清液,放置玻
璃瓶中。如果樣本不立即使用,可在-18℃~-25℃儲存 6 個(gè)月。
重溶血、高濃度的脂類、膽紅素對測定結(jié)果有影響。
[使用前準(zhǔn)備]
試驗(yàn)前,恢復(fù)樣本至室溫,小心搖勻血清樣本。
[實(shí)驗(yàn)方法]
操作方法 I 1、 將實(shí)驗(yàn)所需試劑及樣本放置室溫,平衡至少 30 分鐘以上才可進(jìn)行操作;
2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管進(jìn)行編號,所有實(shí)驗(yàn)均做雙管重復(fù);
3、 取每個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控血清和樣本 200µl 加入相應(yīng)編號的試管中;
4、 每管均各加入 200µl 抗體工作液;
5、 37℃溫育 0.5 小時(shí);
6、 每管均各加入 200µl 標(biāo)記工作液,充分混勻;
7、 37℃溫育 1.5 小時(shí);
8、 每管均各加入 500µl 分離劑后,充分混勻;
9、 室溫放置 5~10 分鐘后,離心 3500 轉(zhuǎn)/分,20 分鐘后,吸去或傾倒掉上清液; 9、用 γ-計(jì)數(shù)器測定各管計(jì)數(shù)CPM. 檢測時(shí)間: 1 分鐘
10、 從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取樣本及質(zhì)控血清的濃度。
[質(zhì)量控制]
每次實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)至少采用兩個(gè)濃度的質(zhì)控血清進(jìn)行質(zhì)量控制,以確保每次實(shí)驗(yàn)測定結(jié)果的可靠性。
1、 質(zhì)控血清的平均值應(yīng)在允許范圍內(nèi);
2、 曲線方程應(yīng)采用*擬合方式;
3、 重復(fù)樣本的測定結(jié)果相差在 15%以內(nèi)。
如不能同時(shí)滿足以上條件,則此次試驗(yàn)結(jié)果無效,全部試驗(yàn)需重新進(jìn)行。
信帆生物提供促黃體生成激素放免代測服務(wù)一步到位