考馬斯亮藍快速染色液脫色方法

常規(guī)染色脫色方法：
 1、電泳結束后，將凝膠置于培養(yǎng)皿內(nèi)，加入染色液，確保覆蓋凝膠。
 2、置于水平搖床或側擺搖床上緩慢搖動，室溫染色 1 小時或更長時間。
 3、倒出染色液（可重復使用 2-3 次）。加入脫色液，確保覆蓋凝膠。
 4、置于搖床上緩慢搖動，室溫脫色 4-24 小時。期間更換脫色液 2-4 次，至藍色背景全部脫去，蛋白條帶染色達到預期效果。一般脫色 1-2 小時后蛋白條帶即可出現(xiàn)。
 5、脫色后，凝膠保存在水中，用于拍照等。水中的凝膠會發(fā)生溶漲，如需避免溶漲，可以把膠保存在含 20%甘油的水中。保存可以制備干膠。
快速染色脫色方法： 
 1、電泳結束后，將凝膠置于適量考馬斯亮藍染色液中，微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰，立即停止加熱。膠濃度大于 10％的凝膠比較堅韌，煮沸時不易破損；膠濃度小于 10%的凝膠，盡量避免煮沸。
 2、在染色液溫度較高的情況下，隨即在搖床上搖動 5-10 分鐘。
 3、倒出染色液（可重復使用 2-3 次）。加入適量脫色液，確保覆蓋凝膠。
 4、微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰，立即停止加熱。
 5、在脫色液溫度較高的情況下，隨即在搖床上搖動 5-10 分鐘。隨后通常能觀察到比較清楚的蛋白條帶。
 6、更換新鮮的脫色液，重復步驟 4 和步驟 5，直至藍色背景全部脫去，蛋白條帶達到預期染色效果。
 7、脫色后，凝膠保存在水中，用于拍照等?；蛑糜诤?20%甘油的水中。保存可以制備干膠。
注意事項：
 1、常規(guī)方法耗時較長，但檢測靈敏度更高，染色效果更加穩(wěn)定。快速方法染色脫色速度快，通常檢測靈敏度略低，微波爐加熱時會出現(xiàn)溶液暴沸導致凝膠碎裂的情況，需特別小心。另外微波爐加熱加速染色液和脫色液中的乙酸揮發(fā)，好在通風櫥中進行。
 2、染色時間取決于凝膠厚度和染色時溫度。凝膠厚，溫度低，染色時間長；凝膠薄，溫度高，染色時間短。凝膠和染色液的顏色一致，在染色液中看不清凝膠時，即為充分染色。染色時間延長效果也更好。   
 3、脫色期間可以在脫色液中加入一片吸水紙，部分染料會吸附在吸水紙上，會加快脫色。脫色時間過長會導致蛋白條帶的顏色變淺。
 4、操作時請穿戴實驗服和一次性手套。