人肺鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞正確傳代

細(xì)胞（英文名：cell）并沒(méi)有統(tǒng)一的定義，比較普遍的提法是：細(xì)胞是生物體基本的結(jié)構(gòu)和功能單位。已知除病毒之外的所有生物均由細(xì)胞所組成，但病毒生命活動(dòng)也必須在細(xì)胞中才能體現(xiàn)。一般來(lái)說(shuō)，細(xì)菌等絕大部分微生物以及原生動(dòng)物由一個(gè)細(xì)胞組成，即單細(xì)胞生物，高等植物與高等動(dòng)物則是多細(xì)胞生物。

細(xì)胞可分為原核細(xì)胞、真核細(xì)胞兩類(lèi)，但也有人提出應(yīng)分為三類(lèi)，即把原屬于原核細(xì)胞的古核細(xì)胞獨(dú)立出來(lái)作為與之并列的一類(lèi)。研究細(xì)胞的學(xué)科稱(chēng)為細(xì)胞生物學(xué)。細(xì)胞體形極微，在顯微鏡下始能窺見(jiàn)，形狀多種多樣。主要由細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)構(gòu)成，表面有細(xì)胞膜。高等植物細(xì)胞膜外有細(xì)胞壁，細(xì)胞質(zhì)中常有質(zhì)體，體內(nèi)有葉綠體和液泡，還有線(xiàn)粒體。動(dòng)物細(xì)胞無(wú)細(xì)胞壁，細(xì)胞質(zhì)中常有中心體，而高等植物細(xì)胞中則無(wú)。細(xì)胞有運(yùn)動(dòng)、營(yíng)養(yǎng)和繁殖等機(jī)能。

培養(yǎng)基 RPMI-1640完-全培養(yǎng)基：90%RPMI-1640+10%FBS

傳代方法 復(fù)蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速?zèng)]入37℃水浴鍋，搖晃凍存管加速溶解，以1min內(nèi)全部溶解為宜；②在超凈臺(tái)中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9mL完-全培養(yǎng)基的離心管內(nèi)，1000-1200rpm離心5min，棄去上清液，用1-2mL完-全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。③將細(xì)胞懸液加入到含有5-6mL完-全培養(yǎng)基的T25瓶中，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

細(xì)胞傳代：①將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入1-2mL胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②鏡下觀(guān)察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細(xì)胞層某處，肉眼可見(jiàn)細(xì)胞層脫落，即消化完成，否則繼續(xù)消化），直接吸掉胰酶，加入5-6mL完-全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落，吹散。③將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐?全培養(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。；④注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí)，重復(fù)傳代操作或者凍存。

生長(zhǎng)條件 37℃；5%CO2+95%空氣；

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)

存儲(chǔ)條件 液氮

安全等級(jí) 0

形態(tài) 上皮細(xì)胞樣，不規(guī)則形

 
共享方式 公益性共享