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革蘭氏染色液使用注意事項

發(fā)布時間: 2024-12-03  點擊次數(shù): 115次

 革蘭氏染色液使用注意事項

革蘭氏染色法是丹麥醫(yī)生 Christain Gram 于 1884 年所發(fā)明,是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法,亦是一種復染法,未經(jīng)染色的細菌,由于其與周圍環(huán)境折光率差別甚小,故在顯微鏡下極難觀察,染色后細菌與環(huán)境形成鮮明對比,可以清楚地觀察到細菌的形態(tài)、排列及某些結構特征,用以分類鑒定,通過此法染色可將細菌鑒別為革蘭陽性菌(G+)和革蘭陰性菌(G-)兩大類。細菌的不同顯色反應是由于細胞壁對乙醇的通透性和抗脫色能力的差異,主要是肽聚糖層厚度和結構決定的,經(jīng)結晶紫染色的細胞用碘液處理后形成不溶性復合物,乙醇能使它脫色,在革蘭陰性細胞染色中乙醇或丙酮破壞了胞壁外膜、損傷肽聚糖層和細胞質膜,結晶紫和碘復合物從細胞中滲漏出來,當再用其他染色液復染時,顯現(xiàn)紅色;紅色染料雖然也能進入已染成紫色的 G+細胞,但被紫色蓋沒,所以紅色顯示不出來;在革蘭陽性細胞染色中,乙醇還能使厚的肽聚糖層脫水,導致孔隙變小,由于結晶紫和碘復合物分子太大,不能通過細胞壁,不易脫色,所以保持著紫色。

 

Standard Gramˊs Stain 采用經(jīng)典的革蘭染色配方, 臨床標本直接涂片,背景干凈,胞核胞質對比強烈,胞內(nèi)吞噬體清晰易辨認,細菌染色特征典型。該試劑僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。

注意事項:

1、本產(chǎn)品經(jīng)過濾處理,如有少量沉淀或不溶物,可靜置后取上清或過濾后使用。

2、涂片之前,應事先在背面做好圓圈標記,以便判斷后續(xù)試驗的位置。

3、取細菌時,應注意自我防護,拔或塞試管塞時,應將試管口通過火焰略加燒灼,最后將接種環(huán)在火焰上燒灼滅菌。

4、加熱固定涂片時,應注意玻片勿太靠近火焰,一般要求玻片溫度不超過60℃,以玻片背面觸及手背皮膚不覺過燙為宜。

5、革蘭氏染色的關鍵在于嚴格掌握脫色程度,脫色時間應根據(jù)經(jīng)驗判斷。脫色過度,陽性菌可被誤染為陰性菌;脫色不夠,陰性菌可被誤染為陽性菌。

6、待檢細菌培養(yǎng)時間會影響染色,陽性菌培養(yǎng)時間過長或已死亡或細菌溶解,常呈陰性。

 

7、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


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