生物樣品儲(chǔ)存方法之凍干保存

凍干，也稱(chēng)為冷凍干燥。凍干可以保證大分子的穩(wěn)定性。凍干是一種通用的方法，可用于存儲(chǔ)大分子，如蛋白質(zhì)，脂質(zhì)和DNA；微生物如細(xì)菌和酵母等，如果經(jīng)驗(yàn)足夠豐富，哺乳動(dòng)物細(xì)胞也可以?xún)龈杀４?。下面?jiǎn)要介紹下凍干過(guò)程。

為了凍干液體樣品，首先-80℃下冷凍。體積越小，此過(guò)程越快，但注意樣品體積應(yīng)不大于容器容量的35％（例如，對(duì)于50ml管，zui大樣本量為17.5ml）?？梢詫悠穬A斜成一個(gè)角度，以增加表面積。

一旦樣品冷凍，將其置于冰上并迅速覆蓋封口膜，記得在封口膜上戳一些孔。將管放入冷凍瓶中，并將其裝載到凍干機(jī)上。

這聽(tīng)起來(lái)很明顯，但確保你知道如何運(yùn)行機(jī)器。特別是關(guān)閉真空，收集樣品時(shí)，如果處理不當(dāng)，樣品可能被吸出來(lái)。要檢查樣品是否*凍干，可以取出試管并輕輕搖動(dòng)。如果有殘留的冰存在，會(huì)聽(tīng)到叮當(dāng)聲。在這種情況下，樣品融化之前，需要將樣品重新放回機(jī)器上。

上述過(guò)程適用于可裝配在1.5-50ml管中的樣品。如果你有一個(gè)更大的樣品，你可能需要使用殼形冷凍（Shell freezing）。

殼形冷凍包括以一定角度旋轉(zhuǎn)含有樣品的燒瓶，同時(shí)將其部分浸沒(méi)在與干冰混合的甲醇或液氮中。當(dāng)燒瓶旋轉(zhuǎn)時(shí)，內(nèi)容物擴(kuò)散到燒瓶的表面上，增加表面積并逐層凍結(jié)。增加表面積增加了冷凍干燥的速度?？赡苓€需要使用冷凍保護(hù)劑，但這又取決于樣品類(lèi)型了。

物樣品儲(chǔ)存方法之凍干保存

1：如果產(chǎn)品在“靜態(tài)”條件下在燒瓶中冷凍，暴露于低壓的表面積zui小化，并且冷凍干燥持續(xù)時(shí)間延長(zhǎng)。

2. 當(dāng)在其軸上凍結(jié)時(shí)，相同的體積，卻具有暴露于低壓的大得多的表面積，并且增強(qiáng)了凍干速率。

3. 較大體積的產(chǎn)品可以通過(guò)升高燒瓶高度，旋轉(zhuǎn)凍干。

4. 較小體積的產(chǎn)品，燒瓶可以直接圍繞瓶軸自轉(zhuǎn)。

物樣品儲(chǔ)存方法之凍干保存

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