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大鼠甘油三酯(TG)elisa試劑盒太給力了

發(fā)布時(shí)間: 2017-06-14  點(diǎn)擊次數(shù): 1029次

大鼠甘油三酯(TG)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

    本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠甘油三酯(TG)水平。用純化的大鼠甘油

三酯(TG)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入甘油三酯(TG) ,

再與 HRP 標(biāo)記的甘油三酯(TG)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗

滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終

的黃色。顏色的深淺和樣品中的甘油三酯(TG)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm波長(zhǎng)下測(cè)定

吸光度(OD 值) ,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠甘油三酯(TG)濃度。

大鼠甘油三酯(TG)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒組成

試劑盒組成 48孔配置 96孔配置 保存

說(shuō)明書 1 份 1份

封板膜 2片(48) 2片(96)

密封袋 1 個(gè) 1個(gè)

酶標(biāo)包被板 1×48 1×96 2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品:2.7 mmol/L 0.5ml×1 瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1 瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存

酶標(biāo)試劑 3 ml×1 瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

樣品稀釋液 3 ml×1 瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

顯色劑 A 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

顯色劑 B 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

終止液 3ml×1 瓶 6ml×1 瓶 2-8℃保存

濃縮洗滌液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30 倍)×1瓶 2-8℃保存

樣本處理及要求

1. 血清:室溫血液自然凝固 10-20 分鐘,離心 20分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分) 。仔細(xì)收集上

清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇 EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,離心

20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分) 。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次

離心。

3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分) 。仔細(xì)收集上清,保存過程

中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心 20分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分) 。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用 PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞

濃度達(dá)到 100萬(wàn)/ml 左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心 20 分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分) 。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的 PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS(PH7.4) ,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分) 。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上

進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測(cè)含 NaN3的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

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