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教你白細胞介素18(IL-18)elisa試劑盒怎樣操作

發(fā)布時間: 2017-10-02  點擊次數(shù): 814次

白細胞介素18(IL-18)elisa試劑盒基本信息

中文名稱白細胞介素-18

英文名稱interleukin-18;IL-18

定  義屬IL-1家族,可由多種組織細胞產(chǎn)生,能誘導Th1細胞產(chǎn)生細胞因子,NK細胞的細胞毒活性,促進T細胞增殖,與IL-12產(chǎn)生協(xié)同作用。

應用學科 免疫學(一級學科),免疫系統(tǒng)(二級學科),免疫分子(三級學科)

白細胞介素18(IL-18)elisa試劑盒如何操作  

實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。

1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。

為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。

3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。

4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。

5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。

6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。

    我司elisa試劑盒的優(yōu)點:操作簡單、快速、靈敏度高、特異性強、性價比高、樣品所需量少

1.操作簡單、快速。所有操作步驟,都有圖譜示意,讓你簡單明了,不必為研究操作步驟而耽擱時間。

2.靈敏度高。 酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導大量的催化反應 ,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應現(xiàn)象。我們的試劑盒實現(xiàn)了在ug、ng、pg水平上對其進行定量。

3.特異性強。特異性來自抗體或抗原的選擇性。采用的*抗體抗原,保證的試劑盒品質(zhì)。

4.性價比高,質(zhì)量穩(wěn)定。

5.樣品所需量少。

如果需要了解該產(chǎn)品詳細信息歡迎大家。

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