常見核酸提取輔助試劑(25:24:1)成分及作用

核酸提取輔助試劑(25:24:1)通常指的是酚::異戊醇試劑，這種試劑由水飽和酚、和異戊醇按25:24:1的體積比混合而成，主要用于RNA或DNA的提取。其中，苯-酚使蛋白質(zhì)變性，同時(shí)抑制了RNase的降解作用；加速有機(jī)相與液相分層，去除核酸溶液中的跡量酚；異戊醇減少蛋白質(zhì)變性操作過程中產(chǎn)生的氣泡。

二、替代試劑方案

Tris平衡酚（pH＞7.8）

成分：主要由苯-酚、Tris-HCl反復(fù)溶解、平衡而得。

用途：用于DNA提取。

優(yōu)勢(shì)：具有特定的pH值（＞7.8），可能更適合某些特定的提取條件或后續(xù)實(shí)驗(yàn)需求。

注意事項(xiàng)：只能用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床。貯存環(huán)境需為4℃環(huán)境保存。

核酸抽提輔助劑（替代物）

有效成分：1-溴-3-氯丙烷（1-Bromo-3-chloropropane）。

用途：作為的替代品，用于RNA或DNA抽提。

優(yōu)勢(shì)：毒性小，具有更強(qiáng)的疏水性，可形成緊密的中間層，減少試劑使用總量，對(duì)分離得到的RNA或DNA的質(zhì)量和得率無影響。

使用方法：以試劑法抽提RNA為例，使用特定試劑盒進(jìn)行單步法抽提RNA時(shí)，需按一定比例配入替代物。

注意事項(xiàng)：使用時(shí)需穿實(shí)驗(yàn)服，佩戴手套、口罩、面罩等防護(hù)用品；具有揮發(fā)性，應(yīng)在通風(fēng)櫥中使用，并及時(shí)擰緊瓶蓋。

三、選擇替代試劑的考慮因素

實(shí)驗(yàn)需求：根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)需求和后續(xù)實(shí)驗(yàn)步驟選擇合適的替代試劑。

試劑性能：考慮替代試劑的純度、穩(wěn)定性、毒性以及是否會(huì)對(duì)提取的核酸質(zhì)量和得率產(chǎn)生影響。

成本效益：在保證實(shí)驗(yàn)效果的前提下，考慮試劑的成本和可獲得性。

安全性：確保所選替代試劑符合實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)定，不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)人員和環(huán)境造成危害。

 僅供科研實(shí)驗(yàn)用，不做其他用途！