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牛凝-血酶Thrombin

牛凝-血酶Thrombin

簡要描述:牛凝-血酶Thrombin:凝-血酶是一種廣泛用于切割標(biāo)簽的蛋白酶,能夠有效切質(zhì)量比僅為1:2000的蛋白。建議消化緩沖液:20mMTris-HCl緩沖液,150mM NaCl,pH8.0,于20℃到37℃之間切割0.3到16小時,1U可切割約0.1-0.5mg蛋白。

產(chǎn)品型號:

所屬分類:生化試劑

更新時間:2024-08-26

廠商性質(zhì):其他

詳情介紹

牛凝-血酶Thrombin
 
簡介:凝-血酶(Thrombin)來源于牛血漿,分子量37KD,是由兩條肽鏈(31KD和6KD)通過二硫鍵組成的。凝-血酶是凝-血酶原(凝-血因子Ⅱ)激活后形成的蛋白質(zhì)水解酶,其催化纖維蛋白原(fibrinogen)水解掉A肽和B肽,由此形成纖維蛋白單體,單體進一步聚合。
由于凝-血酶具有切割序列專一性強,水解效率高的特點,它被廣泛地應(yīng)用于基因工程產(chǎn)品的開發(fā),其應(yīng)用之一是作為工具蛋白酶用于重組融合蛋白質(zhì)的特異性斷裂,尤其適用于生物工程制藥業(yè)及基因工程、生物化學(xué)、分子生物學(xué)等研究。

來源:牛血漿
性狀:白色或微黃色凍干粉
規(guī)格:1000U/支
保存:凍干粉4-8℃保存2年
純度:SDS-PAGE電泳純度≥95%(無蛋白酶)
比活:≥2000U/mgpr
使用方法:生理鹽水溶解使用,復(fù)溶后-20度凍存,避免反復(fù)凍融
用途:凝-血酶時間檢測試劑(TT)配制、纖維蛋白原檢測試劑(FIB)配制、TB位點酶切、納豆激酶活力測定、尿激-酶活力測定等,非臨床治療使用。

凝-血酶是一種廣泛用于切割標(biāo)簽的蛋白酶,能夠有效切質(zhì)量比僅為1:2000的蛋白。建議消化緩沖液:20mMTris-HCl緩沖液,150mM NaCl,pH8.0,于20℃到37℃之間切割0.3到16小時,1U可切割約0.1-0.5mg蛋白。
凝-血酶良好切割位點是X4-X3-P-R[K]-X1'-X2',這里X4和X3是疏水氨基酸而X1'和X2'是非酸性氨基酸,一些經(jīng)常使用的識別位點L-V-P-R-G-S,L-V-P-R-G-F,和M-Y-P-R-G-N。在X4-X3-P-R-G-X2'之間切割比在4-X3-P-K-L-X2'更有效。其他識別位點是X2-R[K]-X1',這里X2或者X1'是甘-氨酸,例如A-R-G和G-K-A,這里切割發(fā)生在第二個殘基后。在凝-血酶切割位點和N末端標(biāo)簽之間插入五個甘-氨酸殘基可改善切,通過這一"甘-氨酸連接肽"只需較少酶量就可達到切割,而且也可以避免可能發(fā)生的錯誤切割。凝-血酶可從切割產(chǎn)物中用p-氨基瓊脂糖親和純化,或者苯甲脒瓊脂糖移去。
 
實驗室操作注意事項:
1.實驗時根據(jù)試驗的情況和性質(zhì)進行必要的防護。根據(jù)試驗可能發(fā)生的危險事故佩戴必要的防護工具,例如穿好試驗服,戴橡膠手套,防護面具,防毒面具等。實驗前,要注意清理試驗場周圍的安全隱患。檢查試驗裝置、藥品和相關(guān)物品是否有不符合要求的情況等。
2.遵循化學(xué)藥品的性質(zhì)和化學(xué)反應(yīng)的規(guī)律,不盲目蠻干和主觀臆測化學(xué)反應(yīng)的過程。應(yīng)根據(jù)化學(xué)反應(yīng)的性質(zhì)和過程選擇匹配的反應(yīng)裝置,不可圖省事省去必要的安全措施。
3.經(jīng)常估計到實驗的危險性
實驗事故雖不可預(yù)測,但其危險性的大小是可以估計到的。即使對不大了解的實驗,也必須推測其危險程度而制訂相應(yīng)的預(yù)防措施。象下面這類實驗,必須十分注意。
①不了解的反應(yīng)及操作;
②存在多種危險性的實驗(如發(fā)生火災(zāi)、毒氣等);
③在嚴(yán)酷的反應(yīng)條件(如高溫、高壓等)下進行的實驗。
4.充分作好發(fā)生事故時的預(yù)防措施并加以檢查。
平時注意熟悉需要關(guān)閉的主要龍頭、電氣開關(guān),滅火器的位置及操作方法,避免發(fā)生事故時才四處尋找應(yīng)急的物品。
5.實驗的后處理。實驗的后處理工作,亦屬實驗過程的組成部份。特別不可忽略回收溶劑和廢液、廢棄物等的處理。


牛凝-血酶Thrombin

 



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