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細(xì)胞粘附劑的使用方法你們掌握了么

發(fā)布時(shí)間: 2019-08-15  點(diǎn)擊次數(shù): 1400次
   細(xì)胞粘附劑是一種新型化合物,用之室溫處理培養(yǎng)瓶30分鐘,能夠使原代或傳代培養(yǎng)細(xì)胞的粘附貼壁能力顯著增加,處理效果優(yōu)于使用多聚賴氨酸和膠原蛋白,同時(shí)對(duì)絕大多細(xì)胞類型均有明顯效果,例如:膠原蛋白處理瓶皿對(duì)HEK293細(xì)胞無效,但細(xì)胞貼壁粘附劑(C1010) 對(duì)HEK293細(xì)胞有很好的效果,且能顯著提高細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率。本產(chǎn)品無細(xì)胞毒性,不影響后續(xù)免疫熒光組化和酶學(xué)測(cè)定等實(shí)驗(yàn),適用于各種原代細(xì)胞如乳鼠腦神經(jīng)元、易漂浮的傳代細(xì)胞如PC12和HEK293細(xì)胞,也適用于藥物處理易漂浮細(xì)胞;其不僅能夠明顯改善細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)、增加細(xì)胞數(shù)量,還可以使細(xì)胞容易耐受洗滌、換液、藥物處理造成的脫落。對(duì)于生長(zhǎng)在處理過的瓶皿中的細(xì)胞而言,使用細(xì)胞貼壁粘附劑可使細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率顯著增加2-5倍。

  下面我們來看看細(xì)胞粘附劑的使用方法:

  1. 使用時(shí),將此濃縮溶液以1:200-1:500比例稀釋于滅菌純水或生理鹽水(0.9% NaCl)或PBS緩沖液中,制備成工作溶液。注意:不同細(xì)胞對(duì)粘附劑的敏感度不同,通常粘附劑處理后的器皿培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)及生長(zhǎng)狀態(tài)均應(yīng)正常,如果細(xì)胞比較敏感,選用高濃度的細(xì)胞貼壁粘附劑會(huì)使細(xì)胞過度粘著,有可能出現(xiàn)細(xì)胞褶皺、偽足伸出不暢或細(xì)胞移動(dòng)分散不佳等現(xiàn)象,此時(shí)應(yīng)將其進(jìn)行高比例稀釋,避免出現(xiàn)以上情況。

  2. 加入新鮮工作液使其*覆蓋培養(yǎng)瓶皿表面。室溫或37 ºC孵育30 min,偶爾搖動(dòng)。

  3. *棄去瓶皿中的液體??捎脺缇麴s水或滅菌生理鹽水或PBS緩沖液等洗滌瓶皿一次,但也可不洗滌而盡量甩干后直接鋪種細(xì)胞。經(jīng)過處理的瓶皿可存放數(shù)天后使用。

  4. 甩干瓶皿即可用于鋪種細(xì)胞,增加多種原代培養(yǎng)細(xì)胞如神經(jīng)元細(xì)胞的貼壁能力。

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